移液器作為實驗室中最基礎(chǔ)且關(guān)鍵的液體轉(zhuǎn)移工具,其準(zhǔn)確性和重復(fù)性直接影響實驗結(jié)果的可靠性。艾本德(Eppendorf)作為實驗室儀器品牌,其移液器以高精度、高耐用性和人性化設(shè)計著稱。然而,即便品質(zhì)優(yōu)良,移液器在長期使用過程中仍會因磨損、污染或操作不當(dāng)而產(chǎn)生誤差。因此,定期進(jìn)行校準(zhǔn)與質(zhì)量控制(質(zhì)控)是保障實驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的必要措施。本文將圍繞艾本德移液器的校準(zhǔn)方法、質(zhì)控要點及日常維護(hù)展開闡述。
一、校準(zhǔn)的重要性與標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)
移液器校準(zhǔn)是指通過標(biāo)準(zhǔn)化方法檢測其實際移液體積與標(biāo)稱體積之間的偏差,并評估其重復(fù)性。國際上普遍采用的標(biāo)準(zhǔn)包括ISO 8655《活塞式容積測量儀器》以及GLP(良好實驗室規(guī)范)和GMP(藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范)等法規(guī)要求。艾本德移液器的校準(zhǔn)通常遵循ISO 8655-6中規(guī)定的“重量法”(Gravimetric Method),即通過精密天平稱量水的質(zhì)量,再根據(jù)水的密度換算為體積,從而判斷移液器的準(zhǔn)確性(系統(tǒng)誤差)和精密度(隨機(jī)誤差)。 二、校準(zhǔn)周期與適用場景
一般建議每3至12個月對移液器進(jìn)行一次全面校準(zhǔn),具體周期取決于使用頻率、操作環(huán)境及實驗要求。例如,在臨床診斷、藥物研發(fā)或計量認(rèn)證實驗室中,應(yīng)每3–6個月校準(zhǔn)一次;而在教學(xué)或常規(guī)科研中,可適當(dāng)延長至每年一次。此外,以下情況也需立即校準(zhǔn):
1. 移液器經(jīng)過維修或更換部件后;
2. 出現(xiàn)明顯操作異常(如漏液、卡頓);
3. 實驗結(jié)果出現(xiàn)無法解釋的偏差;
4. 經(jīng)歷劇烈溫度變化或跌落等物理沖擊。
三、校準(zhǔn)操作的關(guān)鍵步驟
1. 環(huán)境準(zhǔn)備:校準(zhǔn)應(yīng)在恒溫(20–25℃)、濕度適中(45–60%RH)、無振動和氣流干擾的環(huán)境中進(jìn)行。所有器具(包括吸頭、天平、去離子水)需提前平衡至室溫至少2小時。
2. 選擇合適吸頭:必須使用艾本德原廠匹配吸頭,以確保密封性和一致性。非原廠吸頭可能導(dǎo)致漏氣或體積偏差。
3. 預(yù)潤洗:對于揮發(fā)性液體或高精度要求,建議先進(jìn)行3–5次預(yù)潤洗(即吸取并排出液體),使吸頭內(nèi)壁達(dá)到飽和狀態(tài),減少蒸發(fā)影響。
4. 執(zhí)行重量法測試:按照ISO 8655要求,對每個設(shè)定體積至少重復(fù)測量10次,記錄每次稱重結(jié)果。計算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù)(CV%)。通常,CV%應(yīng)小于1%,準(zhǔn)確度偏差應(yīng)在±1%以內(nèi)(具體限值依移液器量程而定)。
5. 數(shù)據(jù)記錄與報告:校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)詳細(xì)記錄,包括日期、操作人員、環(huán)境參數(shù)、設(shè)備編號、測試數(shù)據(jù)及結(jié)論,并歸檔保存,以滿足審計追蹤要求。
四、日常質(zhì)控要點
1. 除定期校準(zhǔn)外,日常使用中的質(zhì)控同樣重要:
2. 正確操作習(xí)慣:垂直持握移液器,緩慢平穩(wěn)地按壓和釋放按鈕,避免快速操作導(dǎo)致體積誤差。
3. 定期清潔與保養(yǎng):每月用70%乙醇或溫和清潔劑擦拭外殼,防止污染物進(jìn)入內(nèi)部機(jī)構(gòu)。若接觸腐蝕性或高粘度液體,應(yīng)及時拆卸清洗。
4. 吸頭安裝規(guī)范:用力適度旋轉(zhuǎn)安裝吸頭,確保氣密性,但避免過度用力損傷錐套。
5. 避免高溫高壓滅菌不當(dāng):部分艾本德移液器支持整支高溫滅菌(如Reference®2系列),但需嚴(yán)格遵循說明書參數(shù),否則可能損壞內(nèi)部彈簧或密封圈。